Il kit di real-time PCR Enterovirus RNA, codificato ENTERORNA.CE, è finalizzato alla rilevazione dell’RNA di Enterovirus in campioni biologici umani (plasma e liquido cerebrospinale). La presenza di un controllo interno (IC) di amplificazione permette di monitorare l’intero processo. Il kit Enterovirus RNA è in grado di determinare l’RNA degli Enterovirus appartenenti ai seguenti sierotipi: Poliovirus 1-3, Coxsackievirus A1-A22, A-24, Coxsackievirus B1-B6, Echovirus 1-9, 11-21, 24-27, 29-33, Enterovirus 68-71. I parechovirus umani (Echovirus 22 e 23) non vengono determinati con questo kit.
NTRODUZIONE
Gli enterovirus umani (fino ad oggi si conoscono 70 sierotipi appartenenti alla famiglia delle Picornaviridae) sono agenti patogeni ubiquitari con un’incidenza elevata a livello mondiale. Sebbene la maggioranza delle infezioni enterovirali umane sia asintomatica, questi virus possono causare un’ampia gamma di sindromi cliniche, dalle patologie delle vie respiratorie superiori a rash febbrile, meningite asettica, pleurodinia, encefalite, paralisi flaccida acuta e malattia simil-settica neonatale. L’enterovirus umano può anche essere implicato nella patogenesi di gravi malattie croniche, tra cui diabete mellito di tipo 1, miocardite, cardiomiopatia congestizia e malattie neuromuscolari. Inoltre, le infezioni enterovirali sono responsabili di un considerevole numero di pazienti affetti da meningite asettica ed encefalite che richiedono un’ospedalizzazione in estate e in autunno.
RINCIPIO DEL TEST
Il kit ENTERORNA.CE si basa su una chimica real-time che utilizza primer e probe specifici.
L’RNA enterovirale, purificato dal campione biologico in esame attraverso una fase di estrazione, viene retrotrascritto in cDNA e amplificato utilizzando il sistema di amplificazione real-time. Il prodotto amplificato viene determinato mediante probe marcato con sostanze fluorescenti (reporter dye) specifico per una sequenza genomica unica degli Enterovirus.
Il controllo interno (IC) eterologo funge da controllo di amplificazione per ogni singolo campione, con l’obiettivo di identificare eventuali inibitori della reazione.
Come controlli della reazione di PCR sono forniti un controllo positivo alto (CTRL-H) e un controllo positivo basso (CTRL-L).
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