Il kit di PCR real-time CMV DNA Quantitation (QT) 2nd Generation, codificato CMVDNAQT.2G.CE, è finalizzato alla quantificazione del DNA di Cytomegalovirus in campioni biologici umani (sangue, plasma, liquido amniotico). La presenza di un controllo interno (IC) di estrazione e/o amplificazione permette di monitorare l’intero processo.
NTRODUZIONE
Il cytomegalovirus umano (HCMV) è un membro ubiquitario della famiglia di virus dell’herpes umano.
Dati clinici indicano che l’HCMV infetta vari tipi di tessuti e cellule e quindi è responsabile di una miriade di complicanze cliniche. A seconda del tipo di tessuto e dello stato immunitario dell’ospite, l’HCMV attiva tre diverse modalità d’infezione: infezioni acute con crescita esplosiva, infezioni persistenti con livelli ridotti di replicazione e infezioni latenti in cui non viene prodotta alcuna progenie virale. Il meccanismo di riattivazione è tuttora sconosciuto, tuttavia sembra essere fortemente correlato a un controllo deficitario del virus da parte del sistema immunitario dell’ospite.
RINCIPIO DEL TEST
Il kit CMVDNAQT.2G.CE si basa su una chimica real-time che utilizza primers e probes specifici.
Il DNA del CMV, purificato dal campione biologico in esame attraverso una fase di estrazione, viene amplificato utilizzando il sistema di amplificazione real-time. Il prodotto amplificato viene determinato e quantificato mediante probe marcato con sostanze fluorescenti (reporter dye), specifico per una sequenza genomica unica del CMV. Il controllo interno (IC) eterologo funge da controllo di estrazione e/o di amplificazione per ogni singolo campione, con l’obiettivo di identificare eventuali inibitori della reazione.
Viene fornita una curva standard per permettere la determinazione del carico virale.